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保護(hù)柱一般帶填料,相當(dāng)于一根縮短了的色譜柱(一般是1-2cm長(zhǎng)度),卡套里可更換的柱芯,柱管、篩板和填料都有。保護(hù)柱里的柱芯好像是在前面開(kāi)路的掃雷隊(duì),流動(dòng)相和樣品里如有什么損害柱子的污染物,保護(hù)柱就自己承受了下來(lái)。
而預(yù)柱,現(xiàn)在一般指的就是接在進(jìn)樣器和色譜柱之前的在線(xiàn)過(guò)濾器。在線(xiàn)過(guò)濾器和保護(hù)柱的大區(qū)別是不帶填料,只有可更換的篩板。預(yù)柱只能保護(hù)其免受顆粒物質(zhì)的污染,而不能阻擋溶解在流動(dòng)相中的強(qiáng)保留物質(zhì)。
保留時(shí)間是液相色譜中一個(gè)很有用的診斷分離問(wèn)題的工具。保留時(shí)間受流動(dòng)相組成、溫度、pH、流速、固定相流失和柱老化等很多因素的影響,如果所有這些參數(shù)保持不變,保留時(shí)間也保持恒定。但在實(shí)際操作中,不可能對(duì)每個(gè)色譜參數(shù)進(jìn)行很完美的控制,如即便加了柱溫箱,溫度還是會(huì)有波動(dòng);流動(dòng)相組成會(huì)因組分揮發(fā)性不同而改變。
所以保留時(shí)間有上下0.02-0.05min的變動(dòng)是非常正常的,對(duì)某些方法有0.1min上下變動(dòng)也屬正常。保留時(shí)間有大的變化,預(yù)示著系統(tǒng)和方法存在問(wèn)題。流路里有氣泡存在,泵閥有泄漏,會(huì)因流量降低而導(dǎo)致保留時(shí)間增加。梯度混合比例閥故障也是保留時(shí)間變化原因之一。
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